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一种沙眼衣原体高效增殖的细胞感染模型及应用

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摘要: 本发明提供了一种沙眼衣原体高效增殖的细胞感染模型及其建立方法,具体为:以永生化人胎盘滋养层细胞HTR‑8/SVneo为宿主,用沙眼衣原体感染该宿主细胞。本发明首次建立了基于健康人源体细胞的沙眼衣原体感染模型,使得沙眼衣原体可以在正常体细胞呈现感染、生存和增殖状态。本发明的细胞感染模型可在不添加放线菌酮的条件下保障沙眼衣原体的快速生长,简化了沙眼衣原体通过Hela细胞等模式宿主进行感染、扩增的步骤,且相较Hela细胞等宿主,沙眼衣原体在本发明细胞感染模型中的感染速度和增殖效率显著提高。本发明为开展沙眼衣原体的病原学特征研究以及沙眼衣原体与宿主的相互作用机制提供了高效的感染模型。
专利类型: 发明专利
申请/专利号: CN202411817525.4
申请日期: 2024-12-11
公告/公开号: CN119799619A
公开日期: 2025-04-11
主分类号: C12N5/073(2010.01);C;C12;C12N;C12N5
分类号: C12N5/073(2010.01);C12N5/10(2006.01);C12N1/20(2006.01);C12R1/01(2006.01);C12N5/073;C12N5/10;C12N1/20;C12R1/01
申请/专利权人: 山西大学
发明/设计人: 董峰;熊承轩;田甜;李奇;冯斌
主申请人地址: 030006 山西省太原市小店区坞城路92号
专利代理机构: 西安汇恩知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人: 宣美娜
国别省市代码: 山西;14
主权项: 1.一种沙眼衣原体高效增殖的细胞感染模型,其特征在于,所述细胞感染模型以永生化人胎盘滋养层HTR-8/SVneo细胞为宿主,用沙眼衣原体感染所述宿主细胞。 2.根据权利要求1所述的一种沙眼衣原体高效增殖的细胞感染模型,其特征在于,所述胎盘滋养层HTR-8/SVneo细胞分离自早孕期的人胎盘组织,并通过导入猿病毒40大T抗原基因的方法实现细胞永生化。 3.一种如权利要求1所述的细胞感染模型的建立方法,其特征在于,包括如下步骤: S1、收集永生化人胎盘滋养层HTR-8/SVneo细胞并接种于6孔板,加入含10%胎牛血清的DMEM/F-12细胞培养基,在培养箱中培养至HTR-8/SVneo细胞融合度达到60%-80%时,弃除细胞培养基,然后用DEAE-葡聚糖溶液在培养箱中处理20-30min,弃除上清液,得到处理后的HTR-8/SVneo细胞; S2、向S1得到的处理后的HTR-8/SVneo细胞加入沙眼衣原体感染液,在培养箱孵育30min后离心,离心完毕后继续在培养箱孵育30min,弃除上清液,得到沙眼衣原体感染的HTR-8/SVneo细胞; S3、向S2得到的沙眼衣原体感染的HTR-8/SVneo细胞加入含10%胎牛血清的DMEM/F-12细胞培养基,在培养箱中培养12-14h,获得沙眼衣原体的HTR-8/SVneo细胞感染模型。 4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述培养箱的培养条件为:温度为37℃、含5%CO2。 5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,S1中所述DEAE-葡聚糖溶液的浓度为30μg/mL。 6.一种如权利要求1所述的细胞感染模型在沙眼衣原体的病原学特征研究以及沙眼衣原体与宿主的相互作用机制研究的应用。
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