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一种荧光探针的制备方法及其在检测四环素、焦磷酸盐离子中的应用

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摘要: 本发明涉及一种荧光探针的制备方法,包括以下步骤:将马齿苋粉末加入乙醇中混合均匀后,进行加热反应,之后冷却至室温,得到悬浮液;将悬浮液离心或过滤去除不溶物,得到均相溶液;将均相溶液在水浴中旋转蒸发,得到溶质;将溶质溶解于超纯水中,冷冻干燥得到碳量子点荧光探针粉末。本发明荧光探针制备方法简单,可快速、高效检测TC和PPi的含量,所制备的荧光探针性能稳定,抗干扰能力强,准确度和灵敏度高,该方法实现了在一个CQDs传感平台上对两个目标的检测,从而提高了分析的效率,减少了资源的消耗。同时能够对PCR扩增反应进行监测。
专利类型: 发明专利
申请/专利号: CN202410854509.6
申请日期: 2024-06-28
公告/公开号: CN118703208A
公开日期: 2024-09-27
主分类号: C09K11/65(2006.01);C;C09;C09K;C09K11
分类号: C09K11/65(2006.01);C12Q1/689(2018.01);C12Q1/686(2018.01);C12N15/11(2006.01);C01B32/15(2017.01);G01N21/64(2006.01);B82Y20/00(2011.01);B82Y40/00(2011.01);C12R1/32(2006.01);C09K11/65;C12Q1/689;C12Q1/686;C12N15/11;C01B32/15;G01N21/64;B82Y20/00;B82Y40/00;C12R1/32
申请/专利权人: 山西大学
发明/设计人: 荆雪娇;吴长新;宋莉
主申请人地址: 030006 山西省太原市小店区坞城路92号
专利代理机构: 山西五维专利事务所(有限公司)
代理人: 茹牡花
国别省市代码: 山西;14
主权项: 1.一种荧光探针的制备方法,其特征在于,包括如下步骤: 将马齿苋粉末加入乙醇中混合均匀后,进行加热反应,之后冷却至室温,得到悬浮液;将悬浮液离心或过滤去除不溶物,得到均相溶液;将均相溶液在水浴中旋转蒸发,得到溶质;将溶质溶解于超纯水中,冷冻干燥得到碳量子点荧光探针粉末。 2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述马齿苋粉末和乙醇的比例为:0.2g:9~11ml。 3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述加热反应温度为190~210℃,反应的时间为9.5~10.5h。 4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法制得的荧光探针。 5.权利要求4所述的荧光探针在检测四环素和焦磷酸盐离子中的应用。 6.利用权利要求4所述的荧光探针检测四环素的方法,其特征在于,包括如下步骤: (1)将荧光探针加入超纯水,超声使其充分溶解,得到CQDs储备液; (2)将四环素粉末加入到无水乙醇,超声使其充分溶解得到四环素储备液; (3)将CQDs储备液和超纯水混合后,得到稀释液,在331nm的激发下,记录在402nm处的荧光值为F0,之后在稀释液中加入不同体积的四环素储备液,得到混合液,记录混合液的荧光值F,通过线性拟合,得到四环素浓度与CQDs荧光强度的线性关系,建立第一线性方程; (4)将CQDs储备液和待测样品混合,通过测量402nm处荧光强度的变化,代入第一线性方程即可得到样品中四环素的含量。 7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述CQDs储备液浓度为5mg/ml;所述稀释液浓度为0.0005mg/ml;所述四环素储备液浓度为1mM;在线性范围0.5-9μM内,第一线性方程为:F0-F=451.812Log c(TC)+173.590,R2=0.9958。 8.利用权利要求4所述的荧光探针检测焦磷酸盐离子的方法,其特征在于,包括如下步骤: (1)将荧光探针加入超纯水,超声使其充分溶解,得到CQDs储备液,将CQDs储备液与Fe3+溶液混合,得到CQDs/Fe3+储备液, (2)将焦磷酸钠粉末加入到超纯水中,漩涡混匀使其充分溶解得到PPi储备液; (3)将CQDs/Fe3+储备液和超纯水混合后,得到稀释液,在331nm的激发下,记录在402nm处的荧光值为F0,之后在稀释液中加入不同体积的PPi储备液,得到混合液,记录混合液的荧光值F,通过线性拟合,得到PPi浓度与CQDs/Fe3+荧光强度的线性关系,建立第二线性方程; (4)将CQDs/Fe3+储备液和待测样品混合,通过测量402nm处荧光强度的变化,代入第二线性方程即可得到样品中PPi的含量。 9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述CQDs储备液浓度为5mg/ml,Fe3+溶液浓度为10mM,CQDs/Fe3+储备液中CQDs储备液和Fe3+溶液的体积比为210:200;所述稀释液浓度为0.0005mg/ml;所述PPi储备液浓度为10mM;在线性范围0.5-9μM内,线性方程为:(F-F0)/F0=171.770Log c(PPi)-113.630,R2=0.9926。 10.利用权利要求4所述的荧光探针检验结核分枝杆菌PCR扩增的方法,其特征在于,包括如下步骤:将荧光探针加入超纯水,超声使其充分溶解,得到CQDs储备液,将CQDs储备液与Fe3+溶液混合,得到CQDs/Fe3+储备液,在CQDs/Fe3+储备液中加入结核分枝杆菌PCR扩增产物,进行荧光检测。
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